Le présent document spécifie les étapes cruciales d'une méthode de réaction de polymérisation en chaîne (qPCR) quantitative en temps réel pour quantifier l'abondance de molécules d'ARNm spécifiques extraites deDaphnia magna.La méthode permet d'identifier les réponses moléculaires aux expositions à des substances potentiellement toxiques par l'analyse de l'abondance de molécules d'ARNm spécifiques. Dans le présent document, les gènes principaux impliqués dans les réponses reproductives et toxiques sont inclus.NOTE La sélection de gènes peut être adaptée à des conditions d'exposition spécifiques, par exemple l'exposition à des substances toxiques connues, en ajoutant des gènes connus pour répondre à une agression spécifique. La présente méthode permet une détection rapide, fiable et sensible des réponses moléculaires et peut être utilisée pour analyser les effets toxiques des éluats aqueux des sols et des déchets. La méthode donne des informations sur la concentration d'une substance ou la dilution d'un liquide d'essai à laquelle les effets toxiques commencent à se manifester avant l'observation d'effets reproductifs ou toxiques à des niveaux d'organisation plus élevés, ce qui réduit la nécessité d'utiliser des facteurs de sécurité dans l'évaluation de la toxicité.La présente méthode est utile dans plusieurs types d'évaluation des dangers. Dans le présent document, les gènes étudiés sont appropriés pour l'évaluation du risque lors du recyclage des matériaux et pour la classification des déchets, mais la méthode peut être adaptée à d'autres types d'évaluation en incluant d'autres gènes.

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