Authenticité des aliments - Quantification de l'ADN équin par rapport à l'ADN mammalien dans la viande de bœuf crue

Le présent document spécifie un protocole de PCR en temps réel pour quantifier l'ADN équin par rapport à l'ADN mammalien total dans un échantillon de viande crue.Les résultats de cet essai équin sont exprimés comme le rapport du nombre de copies de génomes haploïdes équins (genreEquus) sur le nombre total de copies de génomes haploïdes mammaliens. Cet essai est spécifique des représentants du genre Equus et détecte donc l'ADN de cheval, de mulet, d'âne et de zèbre.La méthode a déjà été validée par une étude interlaboratoires et appliquée à de l'ADN extrait d'échantillons constitués de viande crue de cheval sur une base de viande crue de boeuf.La limite de détection a été déterminée par expérimentation comme étant égale à 17 équivalents génomes haploïdes (HGE - haploid genome equivalent) de cheval, pour la PCR équine et la PCR mammalienne, sur la base de la dilution la plus faible des courbes d'étalonnage respectives et par validation intralaboratoire. La plus petite quantité relative de viande de cheval de la séquence cible de l'étude interlaboratoires était une fraction massique de 0,1 pour cent correspondant à des tissus musculaires crus de cheval préparés par gravimétrie sur une base de tissus musculaires crus de boeuf.Le présent document ne traite pas du processus d'évaluation de la conformité.

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